體外受精前要做植入前基因診斷需要如何進(jìn)行？

2018-07-23 06:56:26

大多數(shù)診所在植入前基因診斷都需要進(jìn)行卵裂期胚胎活檢，植入前基因診斷可以使用極體活檢、卵裂期胚胎活檢、囊胚活檢這三種3種技術(shù)之一。

植入前基因診斷需要用到哪些活檢技術(shù)？

1、極體活檢

身體活檢僅適用于女性染色體疾病。成熟的中期卵子擠出單極體。這個(gè)極體可以被移除和測(cè)試，僅提供關(guān)于卵子的染色體內(nèi)容的信息。重要的是，這沒(méi)有提供任何有關(guān)后續(xù)胚胎染色體構(gòu)成的信息。因?yàn)橹挥型ㄟ^(guò)分析極體才能獲得關(guān)于母親的信息，所以沒(méi)有檢測(cè)到受精后發(fā)生的染色體異常。鑒于上面列出的限制，此技術(shù)很少使用。

2、卵裂期胚胎活檢

植入前基因診斷最常見(jiàn)的方法是從第3天胚胎活檢一個(gè)卵裂球，從發(fā)育中的胚胎中提取單個(gè)卵裂球。卵裂球的去除是一個(gè)技術(shù)上具有挑戰(zhàn)性的過(guò)程。胚胎學(xué)家的目標(biāo)，使用特殊的顯微鏡和顯微操作器完成，目的是去除完整的細(xì)胞，對(duì)剩余的胚胎造成最小的創(chuàng)傷。

在從細(xì)胞胚胎中提取單細(xì)胞之前，將胚胎在無(wú)鈣和無(wú)鎂培養(yǎng)基中孵育約20分鐘以降低卵裂球?qū)β蚜亚虻恼掣健Ｈ缓笥帽３治軐⑴咛ス潭ㄔ谝粋?cè)；同時(shí)，在透明帶內(nèi)制作一個(gè)小開(kāi)口以容易進(jìn)入卵裂球。這個(gè)開(kāi)放程序稱為輔助孵化。輔助孵化可以用稀酸性溶液，激光或尖銳刮匙進(jìn)行。小開(kāi)口后，移液管通過(guò)開(kāi)口放置，并聚焦在選擇的卵裂球上，含有可見(jiàn)的核。隨后將卵裂球輕輕地吸入移液管并排入周圍介質(zhì)。現(xiàn)在含有少量卵裂球的胚胎被送回培養(yǎng)箱，放入合適的培養(yǎng)基中。切割階段活檢的局限性在于胚胎可能是鑲嵌的，獲得的卵裂球可能不完全代表整個(gè)胚胎。

3、囊胚活檢

囊胚形成始于卵子取回后第5天，并由內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和外細(xì)胞團(tuán)或滋養(yǎng)外胚層的存在來(lái)定義。在這個(gè)發(fā)育階段，胚胎由100多個(gè)細(xì)胞組成。以與分裂階段胚胎活檢相似的方式在透明帶中破壞孔，并且使用精細(xì)的活檢移液管從滋養(yǎng)外胚層除去細(xì)胞。內(nèi)細(xì)胞團(tuán)未受干擾。

這一過(guò)程的一個(gè)局限性是由于具有多種不同類型的細(xì)胞系的鑲嵌現(xiàn)象，可能從滋養(yǎng)外胚層獲得不代表正在發(fā)育的胚胎的滋養(yǎng)外胚層細(xì)胞。此外，胚胎活檢大約24-48小時(shí)完成遺傳檢測(cè)，由于實(shí)驗(yàn)室胚胎存活能力有限，許多胚胎直到胚胎移植時(shí)才能存活下來(lái)。因此，活檢的囊胚必須冷凍。